Assay data
| Assay name | NO production inhibitory activity |
| Target | 免疫系 |
| Level of test | Cell-based |
| Protocol | ＜ＮＯ産生抑制試験＞ ９６ウェルプレートにマウスマクロファージ様細胞株ＲＡＷ２６４．７細胞を１．２×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調製して、２００ｕｌ撒き、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で、前培養を２時間行ない、ＬＰＳを１００ｎｇ／ｍｌ、ＩＦＮ－γを０．３ｎｇ／ｍｌの濃度になるように添加し、さらに、ＤＭＳＯに溶解した被検物質のサンプルを１００ｕｇ／ｍｌになるように投与した。３７℃、５％ＣＯ２の条件下で、１６時間、本培養を行なった。 培養上清を回収し、ＮＯ２－をグリース試薬により発色させ、５５０ｎｍ（対照６５０ｎｍ）の吸光度を測定し、下記式によりＮＯ産生抑制率を算出した。 ＮＯ産生抑制率＝（1－(ＡＳ－ＡＮ)/(ＡＤ－ＡＮ))×１００ ＡＮ：未処理群の吸光度 ＡＳ：サンプル/ＬＰＳ/ＩＦＮ添加群の吸光度 ＡＤ：ＤＭＳＯ/ＬＰＳ/ＩＦＮ添加群の吸光度 培養上清を回収した残りの細胞にＭＴＴ試薬を０．１ｍｇ／ｍｌの濃度になるように添加し、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で、４時間、培養を行なった。培養上清を捨て、１５０ｕｌのＤＭＳＯに溶解し、５５０ｎｍ（対照６５０ｎｍ）の吸光度を測定し、下記式により細胞生存率を算出した。 細胞生存率＝ＡＳ/ＡＤ×１００ ＡＳ：サンプル/ＬＰＳ/ＩＦＮ添加群の吸光度 ＡＤ：ＤＭＳＯ/ＬＰＳ/ＩＦＮ添加群の吸光度 |
| Result type | |
| Pubmed ID | |
| Memo | マオウ |
| Assay Result Info | % inhibition |