定量法詳細
| 生薬名 | センナ |
| 試験名称 | 定量法 |
| 分析条件 | 本品の粉末約0.5gを精密に量り，共栓遠心沈殿管に入れ，薄めたメタノール(7→10)25mLを加え，30分間振り混ぜ，遠心分離し，上澄液を分取する．残留物は薄めたメタノール(7→10)10mLずつで2回10分間振り混ぜて遠心分離し，上澄液を分取する．全抽出液を合わせ，薄めたメタノール(7→10)を加えて正確に50mLとし，試料溶液とする．別にセンノシドA標準品(別途水分を測定しておく)約10mgを精密に量り，炭酸水素ナトリウム溶液(1→100)に溶かし，正確に20mLとし，標準原液(1)とする．また，センノシドB標準品(別途水分を測定しておく)約10mgを精密に量り，炭酸水素ナトリウム溶液(1→100)に溶かし，正確に20mLとし，標準原液(2)とする．標準原液(1)5mL及び標準原液(2)10mLを正確に量り，メタノールを加えて正確に50mLとし，標準溶液とする．試料溶液及び標準溶液10μLずつを正確にとり，次の条件で液体クロマトグラフィー〈2.01〉により試験を行い，試料溶液のセンノシドA及びセンノシドBのピーク面積ATa及びATb並びに標準溶液のセンノシドA及びセンノシドBのピーク面積ASa及びASbを測定する．次式によりセンノシドA及びセンノシドBの量を求め，それらの合計を総センノシドの量とする． センノシドA(C42H38O20)の量(mg) ＝MSa × ATa／ASa × 1／4 センノシドB(C42H38O20)の量(mg) ＝MSb × ATb／ASb × 1／2 MSa：脱水物に換算したセンノシドA標準品の秤取量(mg) MSb：脱水物に換算したセンノシドB標準品の秤取量(mg) 試験条件 検出器：紫外吸光光度計(測定波長：340nm) カラム：内径4.6mm，長さ15cmのステンレス管に5μmの液体クロマトグラフィー用オクタデシルシリル化シリカゲルを充てんする． カラム温度：50℃付近の一定温度 移動相：薄めたpH5.0の1mol/L酢酸・酢酸ナトリウム緩衝液(1→10)／アセトニトリル混液(17：8)1000mLに臭化テトラn－ヘプチルアンモニウム2.45gを加えて溶かす． 流量：センノシドAの保持時間が約26分になるように調整する． システム適合性 システムの性能：標準溶液10μLにつき，上記の条件で操作するとき，センノシドB，センノシドAの順に溶出し，その分離度は15以上で，センノシドAのピークの理論段数は8000段以上である． システムの再現性：標準溶液10μLにつき，上記の条件で試験を6回繰り返すとき，センノシドAのピーク面積の相対標準偏差は1.5％以下である． |
| 備考 |