定量法詳細
| 生薬名 | チョウトウコウ |
| 試験名称 | 定量法 |
| 分析条件 | 本品の中末約0.2gを精密に量り，共栓遠心沈殿管に入れ，メタノール／希酢酸混液(7：3)30mLを加え，30分間振り混ぜ，遠心分離し，上澄液を分取する．残留物はメタノール／希酢酸混液(7：3)10mLを加えて更に2回，同様に操作する．全抽出液を合わせ，メタノール／希酢酸混液(7：3)を加えて正確に50mLとし，試料溶液とする．別に定量用リンコフィリンをデシケーター(シリカゲル)で24時間乾燥し，その約5mgを精密に量り，メタノール／希酢酸混液(7：3)に溶かして正確に100mLとする．この液1mLを正確に量り，メタノール／希酢酸混液(7：3)を加えて正確に10mLとし，標準溶液(1)とする．別にヒルスチン1mgをメタノール／希酢酸混液(7：3)100mLに溶かし，標準溶液(2)とする．試料溶液，標準溶液(1)及び標準溶液(2)20μLずつを正確にとり，次の条件で液体クロマトグラフィー〈2.01〉により試験を行い，試料溶液のリンコフィリン及びヒルスチンのピーク面積ATa及びATb並びに標準溶液(1)のリンコフィリンのピーク面積ASを測定する． 総アルカロイド(リンコフィリン及びヒルスチン)の量(mg) ＝MS × (ATa＋1.405ATb)／AS × 1／20 MS：定量用リンコフィリンの秤取量(mg) 試験条件 検出器：紫外吸光光度計(測定波長：245nm) カラム：内径4.6mm，長さ25cmのステンレス管に5μmの液体クロマトグラフィー用オクタデシルシリル化シリカゲルを充てんする． カラム温度：40℃付近の一定温度 移動相：酢酸アンモニウム3.85gを水200mLに溶かし，酢酸(100)10mLを加え，水を加えて1000mLとする．この液にアセトニトリル350mLを加える． 流量：リンコフィリンの保持時間が約17分になるように調整する． システム適合性 システムの性能：定量用リンコフィリン5mgをメタノール／希酢酸混液(7：3)100mLに溶かす．この液5mLにアンモニア水(28)1mLを加え，10分間還流又は2時間約50℃で加温する．冷後，反応液1mLを量り，メタノール／希酢酸混液(7：3)を加えて5mLとする．この液20μLにつき，上記の条件で操作するとき，リンコフィリン以外にイソリンコフィリンのピークを認め，リンコフィリンとイソリンコフィリンの分離度は1.5以上である． システムの再現性：標準溶液(1)20μLにつき，上記の条件で試験を6回繰り返すとき，リンコフィリンのピーク面積の相対標準偏差は1.5％以下である． |
| 備考 |