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定量法詳細

生薬名エンゴサク
試験名称定量法
分析条件本品の粉末約1gを精密に量り,メタノール/希塩酸混液(3:1)30mLを加え,還流冷却器を付けて水浴上で30分間加熱し,冷後,ろ過する.残留物はメタノール/希塩酸混液(3:1)15mLを加え,同様に操作する.全ろ液を合わせ,メタノール/希塩酸混液(3:1)を加えて正確に50mLとし,試料溶液とする.別に定量用デヒドロコリダリン硝化物をデシケーター(シリカゲル)で1時間以上乾燥し,その約10mgを精密に量り,メタノール/希塩酸混液(3:1)に溶かして正確に200mLとし,標準溶液とする.試料溶液及び標準溶液5μLずつを正確にとり,次の条件で液体クロマトグラフィー〈2.01〉により試験を行い,それぞれの液のデヒドロコリダリンのピーク面積AT及びASを測定する.
デヒドロコリダリン[デヒドロコリダリン硝化物(C22H24N2O7)として]の量(mg)
=MS × AT/AS × 1/4
MS:定量用デヒドロコリダリン硝化物の秤取量(mg)
試験条件
検出器:紫外吸光光度計(測定波長:340nm)
カラム:内径4.6mm,長さ15cmのステンレス管に5μmの液体クロマトグラフィー用オクタデシルシリル化シリカゲルを充てんする.
カラム温度:40℃付近の一定温度
移動相:リン酸水素二ナトリウム十二水和物17.91gを水970mLに溶かし,リン酸を加えてpH2.2に調整する.この液に過塩素酸ナトリウム14.05gを加えて溶かし,水を加えて正確に1000mLとする.この液にアセトニトリル450mL及びラウリル硫酸ナトリウム0.20gを加えて溶かす.
流量:デヒドロコリダリンの保持時間が約24分になるように調整する.
システム適合性
システムの性能:定量用デヒドロコリダリン硝化物1mg及びベルベリン塩化物1mgを水/アセトニトリル混液(20:9)20mLに溶かす.この液5μLにつき,上記の条件で操作するとき,ベルベリン,デヒドロコリダリンの順に溶出し,その分離度は1.5以上である.
システムの再現性:標準溶液5μLにつき,試験を6回繰り返すとき,デヒドロコリダリンのピーク面積の相対標準偏差は1.5%以下である.
備考