JP assay data
| Crude drug latin name | BUFONIS VENENUM |
| Test name | |
| Analytical Conditions | 本品の粉末をデシケーター(シリカゲル)で24時間乾燥し，その約0.5gを精密に量り，メタノール50mLを加え，還流冷却器を付けて水浴上で1時間加熱し，冷後，ろ過する．残留物は，メタノール30mLで洗い，洗液及びろ液を合わせる．この液にメタノールを加えて正確に100mLとする．この液10mLを正確に量り，内標準溶液5mLを正確に加えた後，メタノールを加えて正確に25mLとし，試料溶液とする．別に定量用ブファリン，定量用シノブファギン及び定量用レジブフォゲニンをデシケーター(シリカゲル)で24時間乾燥し，それぞれ約10mg，約20mg及び約20mgを精密に量り，メタノールに溶かして正確に100mLとする．この液10mLを正確に量り，以下試料溶液と同様に操作し，標準溶液とする．試料溶液及び標準溶液10μLずつにつき，次の条件で液体クロマトグラフィー〈2.01〉により試験を行う．それぞれの液の内標準物質のピーク面積に対するブファリンのピーク面積の比QTB及びQSB，シノブファギンのピーク面積の比QTC及びQSC並びにレジブフォゲニンのピーク面積の比QTR及びQSRを求め，次式によりブファリン，シノブファギン及びレジブフォゲニンの量を計算し，それらの合計をブフォステロイドの量とする． ブファリンの量(mg)＝MSB × QTB／QSB シノブファギンの量(mg)＝MSC × QTC／QSC レジブフォゲニンの量(mg)＝MSR × QTR／QSR MSB：定量用ブファリンの秤取量(mg) MSC：定量用シノブファギンの秤取量(mg) MSR：定量用レジブフォゲニンの秤取量(mg) 内標準溶液 インドメタシンのメタノール溶液(1→4000) 操作条件 検出器：紫外吸光光度計(測定波長：300nm) カラム：内径4～6mm，長さ15～30cmのステンレス管に5～10μmの液体クロマトグラフィー用オクタデシルシリル化シリカゲルを充てんする． カラム温度：40℃付近の一定温度 移動相：薄めたリン酸(1→1000)／アセトニトリル混液(11：9) 流量：内標準物質の保持時間が16～19分になるように調整する． カラムの選定：標準溶液10μLにつき，上記の条件で操作するとき，ブファリン，シノブファギン，レジブフォゲニン，内標準物質の順に溶出し，それぞれのピークが完全に分離するものを用いる． |
| Memo |