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組織培養物及び効率的増殖法_文献

植物名ハナスゲ
ラテン名Anemarrhena asphodeloides Bunge
文献コードAnemarrhena_asphodeloides-Ref-1
出典(著者,雑誌,巻号頁,発行年)Hong S.R. and Yin M.H. Plant Cell Tiss. Cult. 109: 287-296 (2012)
要約(和訳)Anemarrhena asphodeloides Bungeのエンブリオジェニックカルスは、ガラス化によって超低温保存できた。 in vitroで成長した胚形成カルスを、2 mg/Lカイネチン(Kn)、0.1 mg/L NAAおよび0.5 Mショ糖を含むMS培地で25±1℃の連続光下で2日間液体培養した。その後、カルスを2 mLプラスチック製クライオチューブに移し、カルスに2Mグリセロールと0.4Mショ糖の混合物を25±1℃で30分間処理し、0℃で40分間、PVS2で脱水した。新しいPVS2で溶液を交換した後、カルスを液体窒素(LN)に直接浸漬した。35℃の水で5分間急速に解凍した後、カルスをKn 2 mg/L、NAA 0.1 mg/L、3%(w/v)ショ糖および0.75%寒天を入れた固体MS培地に移した。培養物は、光照射の前に5日間暗所に保った(14時間の明暗サイクル)。 30日後、胚形成カルスから発生した胚様体を、Kn 2 mg/L、NAA 0.1 mg/L、3%(w/v)ショ糖および0.75%(w/v)を含む新鮮な固体MS培地に移した。超低温保存後の胚形成カルスの再成長率は60%以上に達した。超低温保存は、体細胞胚形成によるA. asphodeloides Bunge胚形成カルスの植物再生能に影響しなかった。超低温保存したカルスから再生された植物の形態は、実生のものと類似していた。この効率的な超低温保存プロトコルは、超低温での遺伝子バンクにおけるA. asphodeloides Bunge生殖質のex-situ保存に有効である。
目的ガラス化によるA. asphodeloides Bungeの胚形成カルスの凍結保存のためのシンプルで信頼性の高いプロトコルの開発。
材料(品種,系統,産地,由来)医学専門協同組合(中国江省静寧県武同鎮)から入手したA. asphodeloides Bungeの種子
外植片健康な種子を選び、飽和洗浄粉末に約20分間浸し、水道水で30分間洗浄した。次に70%(v / v)アルコールで30秒間、0.1%塩化第二水銀で15分間、表面滅菌し、種を滅菌蒸留水で洗浄した。
初期培養30 g/Lスクロース、7.5 g/L寒天を含む1/2MS固体培地を種子の発芽実験に使用した。培養物を25±1℃、75±5%、16時間の光周期下、36 µmol m-2 s-1で4週間維持し実生を得た。
シュート増殖
発根
馴化条件
鉢上げ・定植
栽培条件
再生植物体の形質
分析した成分
成分の抽出法
分析法
備考