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組織培養物及び効率的増殖法_文献

植物名ウラルカンゾウ
ラテン名Glycyrrhiza uralensis Fisher
文献コードGlycyrrhiza_uralensis-Ref-1
出典(著者,雑誌,巻号頁,発行年)Kusano G et al., Natural Medicines 54: 199-203 (2000)
要約(和訳)絶滅が危惧された甘草屋敷(山梨県塩山市)のウラルカンゾウGlycyrrhiza uralensis Fisch.について,環境整備,地下茎の移植植栽,茎頂培養による復活を試み,所期の目的を果たしたので,その経過を報告する.
目的山梨県塩山市で1720年よりその栽培記録があるウラルカンゾウの特性調査と増殖
材料(品種,系統,産地,由来)1992年に甘草屋敷(山梨県塩山市上於曽)のキウイ畑に生えていたのが確認されたウラルカンゾウ.
外植片1995年5月1日に2本の地下部(径3〜5 mm,長さ約20 cm)を筑波薬用植物栽培試験場(現医薬基盤研究所薬用植物資源研究センター筑波研究部)圃場に移植し,活着した1本より増殖した植物より1997年5月に採取した新芽.
初期培養顕微鏡下,無菌的に取り出した茎頂部を1/3濃度に希釈したMS培地 + IAA 0.1 mg/l + Zeatin 0.3 mg/l(ゲルライトで固化),25℃で培養.
シュート増殖3〜5葉に成長した初代培養シュートから節を切り取り,1/3濃度に希釈したMS培地 + IAA 0.1 mg/l + Zeatin 0.3 mg/l(ゲルライトで固化),25℃で継代培養し増殖.
発根5〜6葉に成長したシュートを1/3希釈MS培地 + IBA 0.1 mg/lで発根.
馴化条件グリーンハウス内
鉢上げ・定植バーミキュライトの入ったビニールポットに植物体を移植し,グリーンハウス内で育成後,秋に圃場に移植し,2年間栽培.
栽培条件
再生植物体の形質圃場移植後2年間栽培した再生植物体の地下部のグリチルリチン含量は,2.81%.
分析した成分Glycyrrhizin
成分の抽出法収穫後,十分乾燥させ粉末とした後,50℃で恒量にしたカンゾウ粉末から50 mgを精密に量り取り,内部標準物質(p-ヒドロキシ安息香酸n-プロピル)0.01 mg/mlを含む50%エタノールを10 ml加え,20分間超音波抽出.その抽出液を0.45 µmのフィルターで濾過し,HPLCサンプルとする.
分析法HPLC条件:column Crestpak C18T(i.d. 4.6 mm x 250 mm; mobile phase acetic acid water (1→15):acetonitrile=3:2;Flow rate 0.6 ml/min; temperature 40℃; detection UV 254 nm; injection volume 20µl.グリチルリチン標準品はナカライテスク(株)より購入.1検体につき3点を分析し,その平均値を算出.
備考