| 植物名 | トウキ |
| ラテン名 | Angelica acutiloba Kitagawa |
| 文献コード | Angelica_acutiloba-Ref-2（文献入手不能) |
| 出典（著者，雑誌，巻号頁，発行年） | Miura Y. et al., Planta Medica 54(1): 79-81 (1988). |
| 要約（和訳） | 商業栽培されているトウキ（Angelica acutiloba）1本を材料に，細胞懸濁培養より誘導した体細胞不定胚を介して増殖させたクローン植物は，種子で増殖させた植物に比べて，根の医薬上有効な化学成分（リグスチライド及びコリン）の含量が非常に均一であった． |
| 目的 | |
| 材料（品種，系統，産地，由来） | |
| 外植片 | 自然交配の大深トウキより選抜した自殖後代（S2）の系統7 |
| 初期培養 | 蕾 |
| シュート増殖 | 水道水で30分間洗浄した蕾はを70%エタノールで10秒間，1%次亜塩素酸ナトリウム液で20分間殺菌し，滅菌水で2回洗浄．これらの蕾は，0.5-1 cm長の切片にし，10-6M 2,4-Dと10-6Mカイネチンを含むLinsmaier-Skoog (LS)寒天培地，25℃，暗所で培養．花梗に形成したカルスは，30日毎に同条件（ただし）で継代．不定胚を形成するカルスは，25℃，暗所，往復式シェーカー（100回/分），同条件の液体培地（30 ml,/100 mlフラスコ）で培養して誘導．これらの培養物は3週間毎に継代． |
| 発根 | 10-6M2,4-D+10-6Mカイネチン含有LS寒天培地で8-10代継代後，10-6M2,4-D含有（カイネチンを含まない）LS寒天培地にで培養すると，2ヶ月後に体細胞不定胚の形成が一部の培養物に観察された．一端体細胞不定胚が誘導されると，継代したカルスは継代後も体細胞不定胚を形成した．カルス又は細胞懸濁培養より誘導した体細胞不定胚は，植物ホルモン無添加LS回転培地に移植し，25℃，14時間/日照明（6000ルクス）で培養． |
| 馴化条件 | 植物ホルモン無添加1/4LS寒天培地1%ショ糖で体細胞不定胚から生育した3〜5 cm長の植物体は，砂とバーミキュライトを1：1で混合した培養土を入れたプランターに移植 |
| 鉢上げ・定植 | 20-25℃の温室で3ヶ月間育成 |
| 栽培条件 | 100個体を株間60 cmで4月に圃場に定植．比較として，生育期が同じ頃の，自然交配で増殖させた後代の大深トウキ100個体，選抜系統自殖後代6系統（S3）100個体を同じ圃場に定植． |
| 再生植物体の形質 | |
| 分析した成分 | 根の乾燥重量の変動係数は3区間で差が無く，クローン植物の乾燥重量は，他の2区より小さかった．しかし，リグスチライド及びコリン含量は，明らかにクローン植物において変動係数が小さかった． |
| 成分の抽出法 | ligustilide, choline |
| 分析法 | 圃場栽培8ヶ月後の12月初旬に収穫し，根を40℃で1週間，温風乾燥．乾燥重量を測定後，粉砕．根の粉末試料0.5 gは，6 mlのクロロホルム-メタノール（2:1)，4℃，暗所で2週間抽出し，リグスチライド含量はYamagishi's methodを用い，以下のGLC条件で分析．カラム：stainless steel column packed with 3% OV-17 (2 m× 3 mm)．カラム温度：200℃，注入温度：250℃，キャリアーガス：N2 (30 ml/min)，検出器：FID，内部標準品：diiso-butyl phthalate.コリン含量は，Hayashi's methodで評価．根の粉末試料（0.5 g）は，沸騰水（30 ml）で1時間抽出し，ろ液を水で50 mlに希釈．この1 mlに0.2 mlの0.5 M酢酸緩衝液（pH5.0），0.1 mlの0.1M KI試薬，4 mlの0.5% I2を含有するエチレンジクロライドを加え，混和20分後，遠心分離し，コリンの含量は，エチレンジクロリド層の385 nmでの吸光度を測定して算出． |
| 備考 | |